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| 22.10.2021 | |||
| 15:30 | PEC Zwolle (W) | 1-2 | PSV (W) |
| 21.10.2021 | |||
| 20:15 | Koninklijke HFC | 8-0 | JOS Watergraafsmeer |
| 20.10.2021 | |||
| 19:30 | Achilles '29 | 1-0 | De Treffers |
| 15:00 | Levadiakos | 1-1 | Kifisia FC |
| 19.10.2021 | |||
| 20:30 | UR La Louvière Centre | 1-2 | Anderlecht U21 |
| 19:15 | HHC Hardenberg | 2-3 | Jong Groningen |
| 17.10.2021 | |||
| 15:00 | Acheron Kanalaki | 1-1 | Kozani FC |
| 15:00 | AE Lefkimmi | 2-1 | Thesprotos |
| 15:00 | AEP Kozani | 1-0 | AE Larisa |
| 15:00 | Anagennisi Artas | 1-2 | Karaiskakis Artas |
| 15:00 | AO Giouchtas | 0-1 | AO Episkopi |
| 15:00 | Charavgiakos | 0-2 | AO Ipato |